لم يكن منذ فترة طويلة أن الهندسة الوراثية كانت مادة الخيال العلمي - مما يجعل كائنًا حيًا ينمو بخصائص أخرى. منذ سبعينيات القرن العشرين ، رغم ذلك ، تقدمت تقنيات المعالجة الوراثية إلى الحد الذي أصبح فيه تقريب الدنا الأجنبي في كائن حي أمراً روتينياً تقريبًا. على سبيل المثال ، يمكن تقسيم الجينات لمقاومة الآفات إلى الذرة ، ويمكن وضع الجينات لصنع الأنسولين البشري في البكتيريا ، ويمكن وضع الجينات لمحاكاة السرطانات البشرية في الفئران المختبرية. تفاصيل الإجراء معقدة للغاية بحيث لا يمكن وصفها في مقالة قصيرة ، مع وجود العديد من الخيارات في كل خطوة ، ولكن المخطط المفاهيمي للتسلسل المنطقي للخطوات واضح إلى حد ما.
احتضان DNA البلازميد والحمض النووي من الاهتمام مع انزيم تقييد. سيكشف إنزيم التقييد عن تسلسل محدد لقواعد الحمض النووي ويقطع الحمض النووي عن بعضها في تلك المرحلة. إنزيمات التقييد مشتقة من بعض آليات دفاع البكتيريا ضد الفيروس. هم جزيئات من شأنها قص الحمض النووي حيث يكتشفون نمط معين من القواعد.
احتضان البلازميد وقطع شظايا الحمض النووي الجيني مع يغاز الحمض النووي. مع معظم إنزيمات التقييد ، سيكون للبلازميد الدائري وشظايا الحمض النووي الجينومي "نهايات لاصقة" مكملة تمسك ببعضها البعض. سوف ligase الحمض النووي ثم الانتهاء من لصق القطع معا. والنتيجة هي مجموعة من البلازميدات الدائرية التي تشمل أجزاء من الحمض النووي الجينومي.
أدخل البلازميدات في البكتيريا وزرع البكتيريا لتنمو مستعمرات الكائنات المشربة بالحمض النووي المعدل. إذا كان لدى البلازميد جين مقاوم للمضادات الحيوية تفتقر إليه البكتيريا المضيفة ، فيمكنك فحص البكتيريا المعدلة بنجاح عن طريق استنبات البكتيريا في وسط نمو مملوء بالمضادات الحيوية. هناك عدة طرق لإدخال البلازميدات في البكتيريا ، مثل استخدام المجهرية الدقيقة ، أو استخدام مجال كهربائي لفتح ثقوب صغيرة في غشاء البكتيريا ، أو مجرد تجميع البكتيريا والبلازميدات معًا في المحلول نفسه وترك البكتيريا تمتصها بطبيعة الحال.
عينة الخلايا من مستعمرات مختلفة من البكتيريا المعدلة. اغسل الخلايا التي تم أخذ عينات منها بمحلول منظف لتحطيم الأغشية البكتيرية واستخراج الحمض النووي ، ثم تسخينه أو تعريضه لهيدروكسيد الصوديوم لفصل الأوتار. هذا الكشف عن تسلسل قاعدة الحمض النووي لتحليلها.
احتضان الحمض النووي مع التحقيق الفلورسنت. تألق ضوء الأشعة فوق البنفسجية على الحمض النووي المحتضن ومراقبة لمضان. يتكون المسبار من تسلسل قصير من الحمض النووي يطابق الحمض النووي الجيني الذي أدخلته. حيث يتطابق المسبار مع الحمض النووي الذي تبحث عنه ، فسوف يتوهج عندما يضيء.
عزل البكتيريا من المستعمرات التي تحتوي على الجين كنت تبحث لإدراج. تكرار الحمض النووي الخاص بك إما عن طريق السماح للمستعمرات البكتيرية تنمو ، أو استخراج الحمض النووي كما فعلت من قبل وتكرار ذلك في جهاز تفاعل سلسلة بوليميريز.