المحتوى
هل تساءلت يوما كيف يدرس العلماء شظايا صغيرة مثل الحمض النووي الخاص بك؟ طريقة واحدة هي هلام الكهربائي. على الرغم من أن الإلكترود ينتج عادة نطاقات واضحة وسهلة القراءة مثالية للتفسير العلمي ، إلا أن النتائج الملطخة تحجب البيانات في بعض الأحيان.
TL ؛ DR (طويل جدًا ؛ لم يقرأ)
يسمح الكهربائي للهلام للعلماء بتخيل العينات المهضومة وقياس أحجام الشظايا. ينتج تلطيخ المواد الهلامية agarose المعدة بشكل غير صحيح ، أو تحميل عينة غير مخففة في الآبار أو باستخدام عينات ذات جودة رديئة.
ما هو الكهربائي؟
يُعتبر الكهربائي الكهربائي للهلام طريقة للعلماء لتصور العينات المهضومة من الجزيئات الصغيرة مثل الحمض النووي وتقدير أحجام تلك الشظايا. لأداء الكهربائي ، يقوم العلماء بإعداد هلام عن طريق تعليق agarose في الماء المغلي. ينتج البلمرة الناتجة بوليمرات سكر متقاطعة بحيث يبدو الجل وكأنه شبكة عنكبوتية على المستوى الكيميائي.
يستخدم العلماء أداة قطع لتشكيل آبار في الجل حتى يتمكنوا من تحميل كميات صغيرة جدًا من العينات المهضومة في الآبار. يؤدي تشغيل الجهاز إلى تشغيل الكهرباء عبر الجل ، وتبدأ الأجزاء الموجودة في العينات في الانتقال من الآبار إلى الجانب الآخر من الجل. نظرًا لأن الهلام يشبه الويب ، فإن الأجزاء الصغيرة تنتقل عبر المصفوفة بسرعة ، بينما تستغرق الأجزاء الأكبر وقتًا أطول للتسلق عبر المصفوفة. عند الانتهاء ، يحتوي الجل على أشرطة مظلمة تمثل المسافة التي قطعتها شظايا مختلفة. يقيس العلماء هذه النطاقات ويستخدمون حسابًا لوغاريتميًا لتحديد حجم كل جزء استنادًا إلى مدى هجرته.
يأمل العلماء في ظهور فرق واضحة ، لكن في بعض الأحيان تشوه العصابات. عادةً ما تكون هذه التلطيخ نتيجة لسوائل الهلام المحضرة أو تحميل عينات غير مخففة في الآبار أو عينات ذات نوعية رديئة.
جل غير مرض إعداد
عندما يتعلق الأمر بنتائج ملطخة ، من المحتمل أن يكون الجاني ضعيفًا. يبلّم الجل المرضي بالتساوي ، وينتج مصفوفة موحدة في جميع أنحاء الجل في صينية الصب. إذا كان جزء من الجل - عادة ما يكون النصف السفلي - يحدد قبل انتهاء العالم من صب الدرج بالكامل ، فسيكون الجل الناتج غير متساوي ويؤدي إلى نتائج مسطّحة.
عينة كثيرة جدا
قبل تحميل العينات في الآبار ، يجب أن تكون تلك العينات مخففة بما يكفي لتشغيلها عبر الجل دون أن تفيض الآبار. إذا كانت العينة المحملة مركزة للغاية لأن العالم نسي تخفيفها أو استخدم عامل تخفيف غير مناسب ، فستكون الشظايا كبيرة جدًا بالنسبة للآبار وتنتج تلطيخًا.
نوعية رديئة عينة
ينتج التلطيخ أيضًا عن سوء جودة العينة. على سبيل المثال ، قد تؤدي عينة الحمض النووي الملوثة بالبروتين أو التي تحتوي على الكثير من الملح إلى إنتاج تلطيخ. كما تؤدي العينات المتدهورة أو المشوهة إلى نتائج سيئة ، بما في ذلك الأشرطة الملطخة.
يعد الإلكتروفل الهلامي طريقة رائعة للعلماء لتصور العينات المهضومة وتحديد حجم الشظية. تحضير دقيق لكل من هلام والعينة يقلل من إمكانية تلطيخ وتنتج عصابات واضحة مثالية للتفسير العلمي.