المحتوى
يستخدم مقياس الطيف الضوئي لتحديد تركيز مركبات معينة ، مثل البروتين ، في محلول. بشكل عام ، يضيء ضوء من خلال كفيت مليء عينة. يتم قياس كمية الضوء التي تمتصها العينة. نظرًا لأن المركبات تمتص الضوء في نطاقات طيفية مختلفة ، يجب تعيين الطول الموجي الصحيح للتحليل. هناك طرق عديدة لحساب تركيز العينات غير المعروفة من خلال القياس الطيفي ، ولكن باستخدام معايير مرجعية يعطي أفضل دقة. علاوة على ذلك ، تشير المعايير أيضًا إلى ما إذا كان مقياس الطيف الضوئي يعاني من خلل أو مشاكل أخرى في التحليل.
حساب من خلال معادلات الخط المستقيم
تحليل المعايير المرجعية في بداية التحليل. المعايير هي تركيزات معروفة وتستخدم لمعايرة المعدات والتحقق من الدقة. يجب أن تندرج جميع العينات ضمن نطاق معايير العمل. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فسوف تحتاج إلى تخفيف العينات أو زيادة تركيز المعايير.
قم بعمل مخطط مبعثر أو رسم بياني خطي مع قراءات التركيز والامتصاص القياسية. سيكون التركيز على المحور ص ، الامتصاصية على المحور السيني. على سبيل المثال ، المعايير هي 1 جزء في المليون و 2.5 جزء في المليون و 5 جزء في المليون. كانت الامتصاصية المعطاة 1 جزء في المليون = 0.25 و 2.5 جزء في المليون = 0.5 و 5 جزء في المليون = 0.75.
قم بتنسيق خط الاتجاه لعرض معادلة على الرسم البياني. سوف تظهر المعادلة الصيغة y = mx + b. على سبيل المثال ، باستخدام المعايير في الخطوة 2 ، تكون المعادلة هي y = .1224x + 0.1531. يتم اعتراض معظم خطوط الاتجاه عند مستوى الصفر ، لكن ذلك يعتمد على الطريقة التحليلية وقيمة التربيع R.
تحليل عينات غير معروفة وتسجيل قراءات الامتصاصية.
استخدم المعادلة (y = mx + b) لتحديد تركيز العينات.
فهم معادلة الخط المستقيم
دع "Y" يساوي التركيز. هذا هو ما سيتم حلها ل.
دع "X" تساوي امتصاصية العينة. هذا هو الامتصاص الذي يقيسه الطيف الضوئي.
اسمح لـ "" بالتساوي في الميل و "b" لتساوي تقاطع y. يتم إعطاء كلاهما ، ولكن إذا تم فرض خط الاتجاه خلال 0 ، فسيكون "b" هو 0.
حل للتركيز. باستخدام المثال في الخطوة 3 ، استبدل "x" كامتصاص معين لـ .563. وبالتالي:
y = .1224 (.63) + 0.1531
y (تركيز) = .222011