المحتوى
الإشريكية القولونية ، الإشريكية القولونية ، هي بكتيريا تنمو في الأمعاء السفلية للثدييات. تم اكتشاف هذه البكتيريا لأول مرة في أواخر القرن التاسع عشر. منذ ذلك الحين ، كان لها تاريخ طويل من الاستخدام في البحث العلمي. هذا هو الكائن الأكثر استخداما في علم الوراثة الجزيئي. جزء من السبب في استخدام E. coli بشكل شائع في البحث العلمي هو أنه من السهل النمو في المختبر. العوامل التي تجعل E. coli سهلة النمو هي احتياجاتها الغذائية البسيطة ، ومعدل النمو السريع ومتطلبات الصيانة المعتدلة.
تعقيم حلقة التلقيح عن طريق وضعها في لهب الموقد بنسن. مرر النصف السفلي من الحلقة عبر اللهب حتى يضيء باللون الأحمر.
السماح للحلقة لتبرد. يمكنك لمسها على أجار معقمة على الصفيحة للتأكد من تهدئتها. لا تضع الحلقة على الطاولة أو تسمح لها بالاتصال بأي شيء آخر غير الآجار المعقمة أو الثقافة المطلوبة الآن بعد تعقيمها.
اغمس الحلقة في ثقافة E. coli ثم أزلها.
افتح لوحة أجار وأنزلق الحلقة برفق للخلف وللأمام عبر سطح قسم واحد من أجار. احرص على عدم خدش أجار مع الحلقة. يوفر الأجار العناصر الغذائية التي يحتاجها E. coli للنمو.
ضع الحلقة في شعلة بنسن مرة أخرى لتعقيمها. بمجرد أن يبرد قضيب العروة ، المسها في قسم معقم من اللوحة للتأكد من أنها باردة ، ثم انزلاق الحلقة خلال خطك الأول لإنشاء سلسلة ثانية. هذه السلسلة الثانية هي نسخة مخففة من السلسلة الأولى. كرر عملية التعقيم والانزلاق هذه حتى يتم تحريك عدة أقسام من لوحة أجار. السبب وراء قيامك بذلك هو أنه يمكنك الاختيار لاحقًا من مستعمرات مستنسخة فردية. سيساعد هذا في التأكد من أن لديك قسمًا واحدًا على الأقل به مستعمرات فردية - غير مركَّز بشكل كبير (والذي سيكون له نمو كبير للغاية ، ولا يسمح لك بالاختيار من مستعمرة واحدة) وليس مخففًا للغاية (لا يعطي مستعمرات) .
تعقيم الحلقة في الشعلة مرة واحدة قبل وضعها جانبا في منطقة العمل.
وضع الجزء العلوي مرة أخرى على لوحة أجار. اقلب اللوحة رأسًا على عقب وضعها في الحاضنة المضبوطة على 37 درجة مئوية (98.6 درجة فهرنهايت). تحاكي درجة حرارة الحضانة المثالية هذه درجة حرارة جسم الإنسان حيث يتواجد E. coli. خلال 24 إلى 48 ساعة ، ستظهر المستعمرات المرئية من بكتيريا E. coli في صفيحة أجار.