المحتوى
عادةً ما يحتوي كل جزيء الحمض النووي الموجود داخل خلاياك على شقين مرتبطين معًا بتفاعلات تسمى روابط الهيدروجين. التغيير في الظروف ، ومع ذلك ، يمكن أن "تدحض" الحمض النووي ويسبب فصل هذه السلاسل. تؤدي إضافة قواعد قوية ، مثل NaOH ، إلى زيادة الرقم الهيدروجيني بشكل كبير ، وبالتالي تقليل تركيز أيون الهيدروجين في المحلول وتغيير طبيعة الحمض النووي المزدوج.
آثار درجة الحموضة
يرتبط تركيز أيون الهيدروكسيد ودرجة الحموضة ارتباطًا مباشرًا ، بمعنى أنه كلما كان الرقم الهيدروجيني أعلى ، زاد تركيز الهيدروكسيد. وبالمثل ، انخفض تركيز أيون الهيدروجين. عند ارتفاع درجة الحموضة ، يكون المحلول غنيًا بأيونات الهيدروكسيد ، ويمكن لهذه الأيونات سالبة الشحنة أن تسحب أيونات الهيدروجين من الجزيئات مثل أزواج القاعدة في الحمض النووي. تعطل هذه العملية الترابط الهيدروجيني الذي يربط خيوط الحمض النووي معًا ، مما يؤدي إلى انفصالهما.
الحمض النووي الريبي مقابل الحمض النووي
على عكس الحمض النووي الريبي ، ينقص الحمض النووي مجموعة الهيدروكسيل في الموضع 2 في كل مجموعة سكر. هذا الاختلاف يجعل الحمض النووي أكثر استقرارًا في المحاليل القلوية. في الحمض النووي الريبي ، يمكن أن تتخلى مجموعة الهيدروكسيل الموجودة في الموضع 2 عن أيون هيدروجين للمحلول عند درجة الحموضة المرتفعة ، مما يخلق أيون ألكسايد شديد التفاعل يهاجم مجموعة الفوسفات التي تجمع اثنين من النكليوتيدات المجاورة معًا. الحمض النووي لا يعاني من هذا العيب ، وبالتالي يتمتع باستقرار ملحوظ عند درجة الحموضة العالية.
القلوية تحلل
يستخدم علماء البيولوجيا الجزيئية في كثير من الأحيان عملية تغيير القلوية لعزل DNA البلازميد من البكتيريا. البلازميدات عبارة عن حلقات صغيرة من الدنا منفصلة عن الكروموسوم البكتيري. في miniprep تحلل القلوية ، يضيف علماء الأحياء المنظفات وهيدروكسيد الصوديوم إلى البكتيريا المعلقة في محلول. يذوب المنظف غشاء الخلية البكتيرية بينما يعزز هيدروكسيد الصوديوم الرقم الهيدروجيني ويجعل المحلول عالي القلوية. عندما تفرج الخلايا المكسورة عن محتوياتها ، ينقسم الحمض النووي داخلها إلى فروع المكون ، أو ينقسم.
Reannealing
بمجرد أن يستخلص العالم البيولوجي الحمض النووي من الخلية ، يضيف كاشفًا آخر لإعادة المحلول إلى درجة الحموضة الأكثر حيادية وترسيب المنظف. التغيير في درجة الحموضة يسمح للبلازميد خيوط لإعادة ومع ذلك ، لا يمكن للكروموسوم الضخم أن يفعل الشيء نفسه ، لذلك يمكن للبيولوجي إزالته مع المنظفات والبروتينات التي تم تغيير طبيعةها وغيرها من الخردة المتنوعة ، تاركًا وراءها البلازميد. التحلل القلوي لا ينقي تمامًا الدنا البلازميد. بدلاً من ذلك ، تعمل كطريقة "سريعة وقذرة" لاستخراجها من الخلية وإزالة معظم الملوثات الأخرى.