المواد الكيميائية المستخدمة في تحليل الحمض النووي

المحتوى

• Ethylenediaminetetaceacetate لتنقية الحمض النووي
• Magneisum كلوريد لتضخيم الحمض النووي
• بروميد إيثيديوم لتلطيخ الحمض النووي

يتضمن تحليل الحمض النووي أنواعًا مختلفة من التجارب الجزيئية والإجراءات البيولوجية. الحمض النووي مادة خام هشة ومعقدة ، لذا فإن تناولها وتحليلها يتطلبان أفضل جودة وأنقى تحضير للمواد الكيميائية. اعتمادا على التحليل ، تشارك مئات من المواد الكيميائية ، من المحاليل الحمضية والأساسية إلى المخازن المؤقتة والأصباغ ، في دراسة الحمض النووي. إن فهم سبب استخدام بعض المواد الكيميائية هو مفتاح إجراء تجارب ناجحة والحصول على نتائج دقيقة وموثوقة وقابلة للتكرار.

Ethylenediaminetetaceacetate لتنقية الحمض النووي

يتم تنقية ثلاثة أنواع من الحمض النووي للعمل العلمي: الحمض النووي من الجينوم (الحمض النووي الوراثي) ، الحمض النووي بأكمله من الخلية (الحمض النووي الكلي) أو من البلازميدات ، والتي يمكن أن تتكاثر ذاتيا. يستخدم تنقية الحمض النووي للخلايا الكلية مواد كيميائية تسمح بتدمير العديد من الأغشية للخلايا أثناء تحلل الخلايا. غالبًا ما يستخدم إيثيل أمينامينيترايتاتيت الكيميائي (EDTA) لسحب أيونات المغنيسيوم ، اللازمة للحفاظ على صلابة جدران الخلايا ، مما يؤدي إلى إضعافها إلى درجة أنها تنهار أو تمزق ، وتطلق محتويات الخلايا والحمض النووي لتحليلها. بالإضافة إلى ذلك ، يحمي EDTA ويحافظ على سلامة الحمض النووي عن طريق تثبيط الإنزيمات الموجودة عادة في الخلية ، والتي يمكن أن تفتيت الحمض النووي وجعله غير صالح للاستخدام.

Magneisum كلوريد لتضخيم الحمض النووي

إن تفاعل سلسلة البوليميريز (PCR) عبارة عن طريقة تحليل معقدة تستخدم لتضخيم عدة آلاف من نسخ جزيء الحمض النووي ، ومع ذلك ، فهي محفوفة بالمشاكل التقنية وعدم الدقة. لذلك ، يقوم العديد من العلماء بشكل روتيني بالعديد من مجموعات مختلفة من PCRs للعثور على أفضل الظروف والمعلمات لجين معين من الاهتمام. إحدى المواد الكيميائية المستخدمة لتنفيذ مثل هذا التحسين هي المغنيسيوم ، الذي يعمل على تثبيت إنزيم بوليميريز الحمض النووي المستخدم في PCR ويعمل كعامل مساعد أساسي لنشاط الإنزيم. ل PCRs ، يستخدم المغنيسيوم في شكل عازلة كلوريد المغنيسيوم.

بروميد إيثيديوم لتلطيخ الحمض النووي

بروميد الإيثيديوم هو صبغة ترتبط بالحمض النووي عن طريق الانزلاق بين النيوكليوتيدات التي تشكل حلزون الدنا المزدوج في عملية تُعرف باسم التقاطع. يمكن بعد ذلك إضاءة هذه الصبغة باستخدام مصباح فوق بنفسجي ، بحيث يمكن تصور الحمض النووي الذي يرتبط به بروميد الإيثيديوم. ومع ذلك ، لا بد من 1 نانوغرام من الحمض النووي على الأقل لرؤية بروميد الإيثيديوم بشكل صحيح ، وبالتالي ، فهي طريقة واحدة للكشف عن الحمض النووي تضخيم PCR. على الرغم من أنها رخيصة ومستخدمة على نطاق واسع ، فهي أيضًا مادة كيميائية مطفرة معروفة بأنها تسبب السرطان ، لذا فإن استخدامه في المختبرات يخضع للتنظيم العالي ، وينتقل كثير من العلماء إلى استخدام بدائل أقل سمية.