المحتوى
- كيف تعمل المخازن المؤقتة
- متطلبات العازلة
- اختيار عازلة Appopriate
- كيفية تغيير درجة الحموضة من العازلة
- أمثلة على المخازن البيولوجية
في الخلايا والكائنات الحية ، يتم الاحتفاظ بالسوائل المحيطة بالخلايا وداخلها عند درجة حموضة ثابتة. درجة الحموضة داخل هذا النظام غالبًا ما تكون ضرورية للتفاعلات الكيميائية الحيوية التي تحدث داخل الكائن الحي. لدراسة العمليات البيولوجية في المختبر ، يستخدم العلماء المخازن المؤقتة للحفاظ على الرقم الهيدروجيني الصحيح أثناء التجربة. تم وصف العديد من المخازن البيولوجية في الأصل من قبل Good وزملاؤه في عام 1966 وما زالت تستخدم في المختبرات اليوم.
كيف تعمل المخازن المؤقتة
المخزن المؤقت هو ببساطة محلول يحتوي على حمض ضعيف وقاعدته المرافقة. عندما يضاف حمض إلى المخزن المؤقت ، فإنه يتفاعل مع القاعدة المرافقة مما يجعل حامضًا ضعيفًا ويؤثر بصعوبة على درجة الحموضة في المحلول.
متطلبات العازلة
هناك عدد من الخصائص تجعل المخزن المؤقت البيولوجي فعالًا. يجب أن تكون قابلة للذوبان في الماء ، ولكن لا تكون قابلة للذوبان أو قابلة للذوبان في المذيبات العضوية. يجب ألا يكون المخزن المؤقت قادرًا على المرور عبر غشاء الخلية ، لأن ذلك قد يؤثر على سلوك الخلية. يجب أن تكون المخازن المؤقتة غير سامة ، ويجب ألا تمتص الأشعة فوق البنفسجية وأن تظل خاملة ومستقرة طوال العملية التجريبية. درجة الحرارة والتكوين الأيوني لا ينبغي أن يغير درجة الحموضة أو سعة التخزين المؤقت.
اختيار عازلة Appopriate
يجب أن يحتوي المخزن المؤقت الذي تم اختياره على pKa في النطاق الأمثل للعملية قيد الدراسة. يكون المخزن المؤقت الذي يحتوي على pKa أعلى مناسبًا إذا كان من المحتمل أن يكون هناك زيادة في الرقم الهيدروجيني أثناء التجربة ، والعكس صحيح إذا كان من المتوقع انخفاض الرقم الهيدروجيني. يجب تحسين تركيزات المخزن المؤقت ، حيث أن التركيزات التي تزيد عن 25 مم قد يكون لديها سعة تخزين مؤقت أفضل ولكن قد تمنع الأنشطة الخلوية مثل الإنزيمات. تملي الطريقة أيضًا استخدام أي مخزن مؤقت ؛ على سبيل المثال ، في رحلان كهربائي ، يكون وجود مخزن مؤقت ذو قوة أيونية منخفضة مناسبًا لمنع تسخين مصفوفة الجل.
كيفية تغيير درجة الحموضة من العازلة
نظرًا لأن درجة الحموضة يمكن أن تتغير مع تغيرات درجة الحرارة ، يجب على العلماء اختبار درجة الحموضة في المخازن المؤقتة في درجة الحرارة التي سيجرون بها التجربة. تريس هو عازلة خاصة عرضة للتغيير في درجة الحموضة مع درجة الحرارة. يجب معايرة جميع أجهزة قياس درجة الحموضة في درجة حرارة العمل. يمكن للمضافات أيضًا تغيير درجة الحموضة ، مما يجعل إعادة الاختبار ضرورية. لتغيير درجة الحموضة ، يضاف حمض ، حمض الهيدروكلوريك عادة ، أو القاعدة ، عادة هيدروكسيد الصوديوم أو البوتاسيوم ؛ يجب أن يتم ذلك ببطء لمنع التغييرات الخاملة أو الكيميائية في المخزن المؤقت.
أمثلة على المخازن البيولوجية
TE العازلة ، والتي هي 10 ملم تريس · حمض الهيدروكلوريك و 1 ملي EDTA ، هو مناسب في عدد من قيم الرقم الهيدروجيني لتخزين الأحماض النووية. الكهربائي هو طريقة شائعة لدراسة البروتينات أو الأحماض النووية ؛ تستخدم هذه العملية عددًا من المخازن المؤقتة ، بما في ذلك المخازن المؤقتة Tris-acetate-EDTA و Tris-glycine و Tris-borate-EDTA. هذه المخازن المؤقتة تمنع تسخين مصفوفة الهلام ويمكن أن تحتوي على إضافات مثل اليوريا و SDS ، اعتمادًا على التحقيق.